Trypsine immunoréactive dans le sang

Trypsine immunoréactive dans le sang - un type d'analyse chez tous les nouveau-nés pour la détection précoce de la fibrose kystique.

La trypsine pancréatique est

une enzyme digestive, synthétisée sous une forme inactive (trypsinogène), dans le duodénum (sous l'influence de l'entéropeptidase) acquiert la capacité de décomposer les protéines en acides aminés. Sans trypsinogène ni trypsine, une personne est incapable de digérer les aliments protéinés.

Une petite partie de la trypsine entrant dans le sang se lie à des inhibiteurs spécifiques (substances qui réduisent son activité) - alpha-1-antitrypsine, alpha-2-macroglobuline.

Toute maladie dans laquelle l'écoulement du suc pancréatique contenant du trypsinogène du pancréas vers les intestins est altéré, entraîne une augmentation du taux de trypsine dans le sang.

La trypsine dans le sang est examinée par une méthode de dosage radio-immunologique, par conséquent l'analyse est appelée «trypsine immunoréactive» ou IRT (Immunoreactive Trypsinogen).

Tous les nourrissons doivent être testés pour la trypsine immunoréactive dans le sang prélevé au talon entre 76 et 92 heures de vie. Le diagnostic et le traitement précoces de la fibrose kystique améliorent la qualité de vie, préviennent le développement de complications graves et ajoutent des années de vie.

La première étude de la trypsine à partir du talon d'un nouveau-né révèle un grand nombre de résultats faux positifs (surestimés), donc l'analyse est répétée sur 21 jours de vie.

Découvrez d'autres tests chez un nouveau-né dans l'article "Nouveau-né - comment et quand se faire tester?".

Fibrose kystique

La fibrose kystique est la maladie congénitale la plus courante de la race caucasienne. À la suite de la mutation des structures des canaux cellulaires qui transportent le chlore, le sodium et l'eau, un mucus épais se forme. Il obstrue les conduits des bronches, du pancréas, du foie, des testicules.

Le gène de la fibrose kystique se transmet de génération en génération, mais tout le monde ne tombe pas malade.

Le gène défectueux CFTR (régulateur de conductance transmembranaire de la fibrose kystique) est situé sur le bras long du chromosome 7. Environ 1000 mutations sont connues, mais chez 68% des patients, la mutation ΔF508.

Symptômes de la fibrose kystique liés à l'âge:

• chez les nouveau-nés - obstruction méconiale, jaunisse physiologique prolongée, gain de poids insuffisant (jusqu'à 1 mois, les enfants n'atteignent pas le poids de naissance), diminution des taux de protéines totales et d'albumine dans le sang, œdème, acidose métabolique
• chez les nourrissons - retard du développement physique et mental, augmentation de l'appétit, selles grasses (souvent examinées pour une intolérance au lait de vache, maladie cœliaque), prolapsus rectal
• chez les enfants d'âge préscolaire - petite taille, doigts de tambour, maladies inflammatoires fréquentes des voies respiratoires - sinusite, bronchite, pneumonie, chez les adultes - azoospermie (absence totale de sperme dans l'analyse du sperme, dans certains cas le seul symptôme), toux fréquente, bronchectasie, polypes dans le nez

Manifestations de la fibrose kystique

• système respiratoire - bronchite chronique, pneumonie, atélectasie, formation de bronchectasie, vomissements chez les enfants en avalant du mucus, toux persistante, fièvre périodique, insuffisance respiratoire et ses complications (pneumothorax, hémoptysie, hypertension pulmonaire, cœur pulmonaire).
• système digestif - un abdomen élargi sur fond de membres minces (ventre d'araignée), des selles volumineuses, grasses et nauséabondes, une augmentation de l'appétit et une faible prise de poids (particulièrement perceptible lors du passage de l'allaitement), une carence en vitamines A, D, E, K, oligo-éléments, prolapsus rectal, syndrome d'obstruction intestinale distale, 10 à 15% sont nés avec une obstruction méconiale
• système hépato-pancréatique - blocage des voies biliaires avec transition vers la cirrhose et l'hypertension portale, jaunisse cholestatique, reflux gastro-œsophagien, pancréatite récurrente, insuffisance pancréatique

Algorithme pour le diagnostic de la fibrose kystique

1. test de trypsine immunoréactive dans le sang (3 jours de vie)
2. retester la trypsine immunoréactive (21 jours de vie)
3. test de sueur
4. Diagnostic ADN avec détection de mutation

La double détermination de la trypsine dans le sang des nouveau-nés permet d'identifier 95 à 98% des patients atteints de fibrose kystique.

Un test de trypsine immunoréactif est prescrit

• tous les nouveau-nés - dans le programme de dépistage néonatal
• avec un test de sudation positif avec une évaluation de la teneur en chlorure de la sueur
• insuffisance pancréatique chronique suspectée
• diagnostic différentiel du syndrome de malabsorption (altération de l'absorption intestinale)

Sous quels symptômes, il convient de déterminer la trypsine immunoréactive dans le sang?

• bronchite fréquente, pneumonie
• bronchectasie
• obstruction intestinale fécale (méconium) chez les nouveau-nés
• selles graisseuses fréquentes
• mauvaise prise de poids

Décodage de l'analyse de la trypsine immunoréactive dans le sang

• lors de la première étude IRT

- moins de 30 mg / l - le résultat est négatif, aucune analyse répétée n'est effectuée

- plus de 60 mg / l - le résultat est positif, une nouvelle analyse est nécessaire

• dans la deuxième étude IRT

- moins de 30 mg / l - le résultat est négatif, d'autres tests ne sont pas effectués

- plus de 30 mg / l - le résultat est positif, un examen supplémentaire est nécessaire - test de sueur, test ADN

N'oubliez pas que chaque laboratoire, ou plutôt l'équipement et les réactifs de laboratoire, a ses «propres» normes. Dans le formulaire de test de laboratoire, ils vont dans la colonne - valeurs de référence ou norme.

Trypsine dans le sang

La teneur en trypsine sérique est normalement de 25,0 ± 5,3 mg / l.

Fonction de la trypsine dans le corps humain

La trypsine est sécrétée par le pancréas sous forme de précurseur inactif, le trypsinogène, qui est activé par l'entérokinase. Le pancréas est la seule source de formation de trypsine et, par conséquent, la détermination de son activité fournit des informations plus précieuses sur l'état du pancréas que l'étude d'autres enzymes. L'étude de l'activité de la trypsine est d'un grand intérêt pour le diagnostic de la pancréatite aiguë, ainsi que pour résoudre un certain nombre de problèmes controversés de la pathogenèse de la maladie et pour justifier l'opportunité d'utiliser des antienzymes dans le traitement complexe de cette maladie..

Trypsine à la suite d'un test sanguin

L'évaluation clinique du niveau d'activité de la trypsine dans le sérum sanguin doit être réalisée en association avec le niveau des inhibiteurs de la trypsine, où 90% de l'activité inhibitrice de la trypsine du sérum sanguin tombe sur l'alpha-1-antitrypsine.

La pancréatite aiguë est caractérisée par une augmentation à court terme de 10 à 40 fois l'activité de la trypsine au début de la maladie. Sous l'influence de diverses causes entraînant des lésions du tissu du pancréas dans la pancréatite aiguë, l'équilibre dynamique du système trypsine-alpha-1-antitrypsine est perturbé. L'apparition de la maladie est associée à l'activation de la trypsine dans le pancréas. Dans les premières heures de la maladie, en réponse à l'apport massif de trypsine active dans le liquide tissulaire, la lymphe et le sang, l'activité de l'alpha-1-antitrypsine augmente. Cependant, dans la pancréatite aiguë, l'alpha-1-antitrypsine est progressivement épuisée, ce qui indique le passage du processus au stade nécrotique. Une augmentation de l'activité de l'alpha-1-antitrypsine dans la pancréatite aiguë est observée le 2-3ème jour de la maladie, et après le 3ème jour, sa diminution est révélée. Avec le développement rapide de la nécrose pancréatique, l'augmentation de l'alpha-1-antitrypsine dans le sang est très insignifiante, ce qui est une indication directe pour une utilisation dans le traitement complexe des antienzymes.

Dans la pancréatite chronique récurrente chez 25 à 50% des patients lors d'une exacerbation, une augmentation de la trypsine sérique n'est pas détectée (en particulier en présence de stéatorrhée). L'absence d'augmentation de l'activité de la trypsine dans de tels cas est due à un manque de fonction pancréatique. Chez 20% des patients atteints de pancréatite chronique, les taux sanguins de trypsine augmentent. Le tableau clinique de la maladie n'est généralement pas corrélé avec le niveau d'augmentation de la trypsine. Avec le passage de la pancréatite chronique récurrente au stade de la rémission, la normalisation de la teneur en alpha-1-antitrypsine est observée beaucoup moins fréquemment qu'une diminution de l'activité de la trypsine. Cela reflète l'un des mécanismes pour arrêter l'exacerbation du processus, c'est-à-dire des niveaux accrus d'alpha-1-antitrypsine favorisent la rémission.

Augmentation des taux de trypsine dans le sang

Une augmentation de l'activité de la trypsine dans le sang est parfois observée chez les patients atteints d'un cancer du pancréas; chez les nouveau-nés, il s'agit d'un test spécifique de la fibrose kystique; chez les patients atteints d'insuffisance rénale chronique est le résultat d'une accumulation excessive de ses inhibiteurs; avec des infections virales, avec des lésions «silencieuses» du pancréas.

En raison du fait que le trypsinogène enzymatiquement inactif, les complexes de trypsine avec l'alpha-1-antitrypsine et les complexes enzymatiquement actifs de la trypsine avec l'alpha-2-macroglobuline circulent dans le sang, les méthodes biochimiques de détermination de la trypsine basées sur le clivage de divers substrats ne sont pas fiables. Ils reflètent l'activité totale des complexes répertoriés. La méthode la plus fiable est la méthode radioimmunologique pour la détermination de la trypsine dans le sang..

Diminution de la teneur en trypsine sanguine

L'activité de la trypsine dans le sérum est réduite chez les patients atteints de diabète sucré, de fibrose kystique (au stade avancé), parfois chez les patients atteints de pancréatite chronique et de cancer du pancréas.

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Fibrose kystique chez les enfants

La fibrose kystique (fibrose kystique du pancréas) est une maladie héréditaire qui se transmet de manière autosomique récessive. La maladie est causée par des lésions systémiques des glandes exocrines, à la fois mucus (voies respiratoires, intestins, pancréas) et séreuses (salivaires, sudoripares, lacrymales).

Une caractéristique typique de la fibrose kystique est une augmentation de la viscosité de la sécrétion des glandes formant du mucus, ce qui, en relation avec le système bronchopulmonaire, provoque une violation marquée de la fonction de nettoyage des bronches et de la perméabilité bronchique..

Jusqu'à récemment, il y avait une idée que la fibrose kystique est presque exclusivement un problème pédiatrique, car les patients, en règle générale, décédaient dans la petite enfance et survivaient rarement à l'adolescence et encore plus à l'âge adulte. Les cas de fibrose kystique chez les adultes ont été considérés comme la casuistique la plus rare. Ces dernières années, la situation a considérablement changé. Ainsi, grâce à l'amélioration des méthodes de traitement, le nombre de patients atteints de fibrose kystique vivant jusqu'à 20 ans ou plus a considérablement augmenté. D'autre part, l'utilisation généralisée de méthodes de diagnostic modernes, en particulier le test dit de la sueur, a permis de reconnaître des formes relativement favorables et effacées de la maladie chez l'adulte. Il y avait un point de vue, non sans fondement, selon lequel des formes effacées et dans la plupart des cas indétectables de la maladie considérée sous-tendent la bronchite obstructive et d'autres pathologies bronchopulmonaires chroniques chez un nombre significatif de patients. L'incidence de la fibrose kystique chez les nouveau-nés vivants varie de 1: 8000 à 1: 559.

Selon la plupart des chercheurs, la fibrose kystique est une maladie avec un mode de transmission autosomique récessif..

Ces dernières années, grâce aux progrès de la génétique moléculaire dans le clonage de séquences d'ADN, la localisation du gène mutant dans le bras long du 7ème chromosome a été établie.

Le processus infectieux dans l'arbre bronchique joue un rôle important dans le développement de la fibrose kystique. Cela est dû non seulement à une violation de la fonction de drainage et de nettoyage des voies respiratoires, mais également à une diminution significative de l'immunité. La flore prédominante dans le contenu bronchique est Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus et Haemophilus influenzae, souvent en association. Pseudomonas aeruginosa chronique provoque des changements dans le système immunitaire.

Le principal symptôme morphologique de la fibrose kystique est la détection d'une sécrétion visqueuse visqueuse dans la lumière des bronches et dans les canaux excréteurs des glandes muqueuses. Parfois, des kystes se développent à la place des glandes. Lors de l'autopsie de la majorité des personnes décédées de la fibrose kystique, une bronchite purulente massive, une pneumonie de drainage massive sont observées.

Les signes cliniques de lésion pulmonaire dans la fibrose kystique surviennent le plus souvent au cours de la première année de la vie d'un enfant. Le tableau clinique de la fibrose kystique est assez varié. Les patients s'inquiètent de la toux avec des expectorations visqueuses difficiles à expectorer, une hémoptysie. Dans la plupart des cas, il y a une plainte d'essoufflement avec un effort physique modéré, et parfois même au repos. Dans de nombreux cas, dès la première année de vie, des troubles digestifs, une mauvaise tolérance aux graisses et des douleurs abdominales sont observés. Les enfants ne prennent généralement pas bien du poids. Un prolapsus rectal est parfois observé.

L'image radiographique de la fibrose kystique dépend largement de la gravité et de la phase de la maladie, ainsi que de l'âge des patients. Une augmentation généralisée du schéma pulmonaire est considérée comme typique. Le schéma pulmonaire semble lourd ou réticulé. Dans la plupart des cas, ces changements et d'autres sont combinés. Les racines des poumons ont tendance à apparaître hypertrophiées. Dans certains cas, il y a une image d'atélectasie lobulaire, sous-segmentaire ou même segmentaire (effondrement du tissu pulmonaire). Dans le cas d'une augmentation de la légèreté des poumons, il y a une augmentation de la transparence des champs pulmonaires principalement dans les sections supérieures, moins souvent - faible position et mobilité insuffisante du diaphragme.

Pendant les exacerbations, des changements interstitiels dans le schéma pulmonaire augmentent, souvent une pneumonie segmentaire ou polysegmentale apparaît.

L'examen bronchoscopique révèle une endobronchite purulente diffuse. Le secret est visqueux et est à peine aspiré de l'arbre trachéobronchique.

L'apparition précoce des manifestations pulmonaires, ainsi que le développement physique retardé, la diarrhée fréquente et l'intolérance aux aliments gras sont considérés comme des signes cliniques assez caractéristiques de la fibrose kystique. Une identification minutieuse des antécédents familiaux a également une certaine valeur diagnostique (en particulier, la présence chez des proches malades ou décédés dans la petite enfance d'une occlusion intestinale ou d'une diarrhée persistante, ainsi que de maladies respiratoires (pneumonie) ou de fièvre d'origine inconnue).

Le test de la sueur ("test de la sueur") est extrêmement important, voire déterminant dans le diagnostic de la fibrose kystique.

La maladie se poursuit avec des exacerbations périodiques du processus inflammatoire dans le système bronchopulmonaire. Les enfants sont caractérisés par un cours continuellement récurrent (avec des exacerbations périodiques) du processus. La prévalence du processus pathologique dans les poumons, un manque persistant d'oxygène créent les conditions d'une augmentation de la pression dans l'artère pulmonaire. Les signes de cœur pulmonaire sont souvent trouvés chez les jeunes enfants..

Parmi les complications de la fibrose kystique du système respiratoire, le pneumothorax spontané doit être mentionné. Avec la formation d'un pneumothorax valvulaire, cette complication peut mettre la vie en danger, en particulier en cas d'insuffisance respiratoire sévère. La complication peut être reconnue par l'apparition soudaine de douleurs thoraciques, l'apparition ou une forte augmentation de l'essoufflement, ainsi que par des symptômes objectifs et radiologiques caractéristiques.

Les enfants souffrant de fibrose kystique ont un retard dans le développement sexuel. Chez les hommes adultes, il y a une diminution de la fonction sexuelle et, dans de nombreux cas, une stérilité associée à une altération de la motilité des spermatozoïdes.

Le traitement de la fibrose kystique vise à supprimer le processus infectieux dans le système bronchopulmonaire, améliorant la perméabilité bronchique. Il comprend la correction de l'insuffisance pancréatique et la thérapie diététique chez les patients atteints d'une forme mixte de la maladie..

L'antibiothérapie occupe une place particulière dans le traitement des patients atteints de fibrose kystique. Les antibiotiques sont prescrits pendant la période d'exacerbation du processus inflammatoire dans le système bronchopulmonaire. En raison d'exacerbations fréquentes et souvent avec une évolution continuellement récurrente (avec des exacerbations périodiques) de la maladie, les traitements antibiotiques sont généralement longs et répétés.

Dans le traitement de la fibrose kystique, des antibiotiques à large spectre sont généralement utilisés (aminosides, carbénicilline, céphalosporines des troisième et quatrième générations, quinolones).

Les violations de la perméabilité bronchique chez les patients atteints de fibrose kystique dépendent de l'accumulation d'expectorations visqueuses dans les voies respiratoires, qui ne peuvent pas être évacuées par l'activité de l'épithélium cilié ou le mécanisme de la toux. Les inhalations en aérosol de mucolytiques modernes, c'est-à-dire de médicaments qui fluidifient les expectorations (acétylcystéine et ses analogues, mucosolvine, mucome), ont un effet thérapeutique bénéfique. L'inhalation par ultrasons d'une solution de chlorure de sodium à 3% est également bénéfique. La bronchoscopie thérapeutique (d'assainissement) est d'une grande importance, en particulier dans le cas des formes modérées et sévères de la maladie. Au cours de la bronchoscopie, des médicaments mucolytiques et des antibiotiques sont largement introduits dans l'arbre bronchique. Ces dernières années, un lavage bronchoalvéolaire a également été utilisé. Les massages vibrants et les exercices de physiothérapie jouent un rôle essentiel dans l'amélioration de la perméabilité bronchique..

La diététique chez les patients atteints d'une forme mixte de la maladie prévoit une certaine restriction des graisses avec l'administration simultanée de vitamines liposolubles (A, D, E) et une augmentation de l'apport en protéines à 3-5 g par 1 kg de poids corporel par jour, une augmentation du contenu calorique des aliments. L'absence de fonction pancréatique est une indication d'un traitement substitutif (pancréatine, panzinorm-forte, festal, créon).

Le problème de la détection précoce de la fibrose kystique est extrêmement important. La détection précoce des patients et l'organisation d'une observation spéciale et systématique peuvent améliorer considérablement le pronostic de la maladie. De toute évidence, l'introduction du dépistage de masse de la fibrose kystique des nouveau-nés et des jeunes enfants est justifiée.

L'étude des nouveau-nés pour le portage du gène de la fibrose kystique, qui est utilisé dans certaines villes de notre pays, dans un certain nombre de pays étrangers, permet d'établir un diagnostic dès les premiers jours de la vie et de démarrer un traitement adéquat tôt.

Une attention particulière est accordée à la possibilité d'un diagnostic prénatal de la pathologie. Le diagnostic prénatal au début de la grossesse peut empêcher la naissance d'enfants malades.

Le pronostic de la fibrose kystique reste très sérieux. Il est considéré comme plus favorable en cas d'apparition tardive des signes de la maladie et de formes effacées et fluides. Dans de nombreux cas, un diagnostic précoce et un traitement complexe commencé en temps opportun peuvent empêcher la progression rapide de la maladie et prolonger de manière très significative la vie.

Trypsine immunoréactive dans le sang des nouveau-nés (test de fibrose kystique congénitale)

La fibrose kystique (fibrose kystique) est une maladie assez courante. La fibrose kystique est héréditaire de manière autosomique récessive, elle est détectée chez 1 nouveau-né sur 1500 à 2500. En raison d'un diagnostic précoce et d'un traitement efficace, la maladie n'est plus considérée comme inhérente uniquement à l'enfance et à l'adolescence. Au fur et à mesure que les méthodes de traitement et de diagnostic s'améliorent, de plus en plus de patients atteignent l'âge adulte. Actuellement, 50% des patients vivent jusqu'à 25 ans. La principale méthode de diagnostic postnatal précoce de la fibrose kystique consiste à déterminer la concentration de trypsine dans le sérum sanguin des nouveau-nés. Les valeurs de référence de la trypsine immunoréactive (IRT) dans le sérum sont données dans le tableau.

Tableau Valeurs de référence de la concentration de trypsine immunoréactive dans le sérum sanguin

Une augmentation de la concentration de trypsine dans le sérum sanguin des enfants dans les premières semaines après la naissance indique la présence de fibrose kystique, et par conséquent, la détermination de cet indicateur est considérée comme une méthode de dépistage efficace. Au fur et à mesure que la maladie progresse et qu'une véritable insuffisance pancréatique se développe, la concentration de trypsine dans le sérum diminue.

Diverses méthodes d'examen de la fonction du pancréas

Trypsine immunoréactive sérique, inhibiteurs de la trypsine, trypsinogène

La détermination de l'activité de la trypsine dans le sérum sanguin, produite uniquement par les cellules acineuses du pancréas, est d'une grande importance dans le diagnostic de la pancréatite. Ainsi, cette enzyme est spécifique du pancréas.

La teneur en trypsine immunoréactive dans le sérum sanguin peut être mesurée assez précisément à l'aide d'un radio-immunodosage. Cette méthode est décrite en détail par T.P. Bois, mais son application clinique est limitée, car l'expérience accumulée a montré que la mesure de l'activité de la trypsine sérique n'est pas assez sensible pour son utilisation réussie comme test de diagnostic dans la CP. Il est prouvé que dans un certain nombre de cas avec OP et exacerbation de CP, l'activité enzymatique dans le sang peut augmenter de 20 à 70 fois.

La faible fiabilité de l'étude est due à la liaison de la trypsine active aux inhibiteurs - a1-antitrypsine et a2-macroglobuline. Dans le même temps, les anticorps contenus dans les kits de diagnostic correspondants "reconnaissent" mal la trypsine en combinaison avec des inhibiteurs. Ceci explique le fait que la spécificité du test est supérieure à 95%, et la sensibilité n'est que de 40%. En pratique clinique, la fréquence des résultats faux négatifs est assez élevée, par conséquent, ce test est considéré comme insatisfaisant..

Une augmentation du taux de trypsine immunoréactive se trouve dans l'insuffisance rénale chronique, l'hypercorgisme, le cancer du pancréas, la cholécystite calculeuse. Les faibles indices d'activité de la trypsine immunoréactive sont spécifiques de l'insuffisance pancréatique exocrine. La courbe monotone de la dynamique de l'activité enzymatique après la charge alimentaire est particulièrement caractéristique dans les études expérimentales et cliniques..

Un certain nombre d'auteurs proposent d'utiliser la détermination de l'activité de la trypsine immunoréactive dans le sang comme test de dépistage pour le diagnostic de l'insuffisance pancréatique exocrine chez les patients atteints de CP à long terme avec un résultat en fibrose organique. Cependant, une diminution de l'indicateur peut être enregistrée dans le cancer du pancréas. Pour réduire la fréquence des résultats de recherche pré-négatifs en CP, il est proposé de déterminer l'activité de l'enzyme et de ses inhibiteurs après stimulation par la cérulsine, la pancréosimine ou la charge alimentaire.

La détermination de la teneur en inhibiteurs de la trypsine dans le sérum sanguin est également utilisée pour diagnostiquer la pancréatite, cependant, leurs indicateurs sont multidirectionnels et une interprétation claire des résultats n'est pas toujours possible. Une augmentation du taux d'inhibiteurs de la trypsine dans le sang indique souvent la mobilisation du système inhibiteur plasmatique, ce qui provoque des paramètres pseudo-normaux de la trypsypémie. À l'inverse, une faible teneur en inhibiteurs plasmatiques indique généralement leur consommation active, une diminution de la capacité ou l'épuisement des mécanismes de défense lors d'une destruction sévère du pancréas. Dans le même temps, les rapports d'inhibition de la protéase sérique ne reflètent pas ceux du tissu pancréatique et ne peuvent donc pas informer le médecin de la forme, de la gravité et, dans certains cas, de la confirmation du diagnostic de pancréatite.

Le trypsinogène circulant dans le sang est divisé en kagionique et anionique par polarité. Le rapport normal de ces formes dans le sérum sanguin est de 2: 1. Avec la pancréatite, il y a une augmentation plus prononcée du sang de la forme anionique du trypsinogène.

Ces dernières années, des données ont été publiées sur le contenu d'information suffisant pour déterminer la teneur en trypsinogène dans l'urine. La sensibilité et la spécificité de la détermination du taux de trypsinogène-2 dans l'urine dans le diagnostic différentiel de l'OP et de la pathologie abdominale aiguë d'origine non pancréatique atteignent respectivement 91-95% et 95-99%.

Lipase et phospholipase sériques

L'hyperlipasémie n'est pas considérée comme strictement spécifique de la pathologie pancréatique, car elle survient dans d'autres maladies gastro-intestinales. Néanmoins, une augmentation de l'activité des lipases sanguines est deux fois plus spécifique de la pancréatite que l'hyperamilasémie. En effet, l'hyperlipasémie n'est pas détectée dans l'appendicite, la grossesse extra-utérine, la parotidite, le cancer du poumon, mais elle est enregistrée chez 60% des patients atteints de maladies du système hépatobiliaire, avec obstruction intestinale, insuffisance rénale, cancer de la prostate et autres maladies non pancréatiques. Il est impossible de déterminer la gravité de l'exacerbation actuelle de la pancréatite et le pronostic immédiat par l'activité lipase sérique. Plus précisément, une diminution de l'activité de l'enzyme dans le sang dans la fibrose pancréatique résultant de la CP et la fibrose kystique.

Ces dernières années, une grande importance dans le diagnostic de la pancréatite, dans la détermination du pronostic et de la probabilité de complications a été attribuée à l'étude de l'activité de la phospholipase A2 dans le sang et l'urine. Cela est dû au fait qu'il joue un rôle essentiel dans la pathogenèse de la pancréatite en raison du tropisme des lipides des membranes cellulaires et de la capacité à les endommager. De plus, la phospholipase A2, séparant l'acide gras de la lécithine, favorise la formation de lysolécithine, qui, lorsqu'elle pénètre dans le GLP, provoque un œdème en quelques minutes et après quelques heures - une nécrose du parenchyme pancréatique. C'est pourquoi une augmentation de l'activité de la phospholipase dans le sang est considérée comme un marqueur idéal des processus destructeurs..

Les résultats d'un certain nombre d'études indiquent une sensibilité élevée (jusqu'à 100%) et une spécificité (jusqu'à 90%) pour déterminer l'activité dans le sang de la phospholipase A2 de type I dans la pancréatite, car elle est considérée comme une enzyme pancréatique spécifique. Il a été prouvé qu'une augmentation de son activité dans le sang se produit plus tôt et dure plus longtemps qu'une augmentation de l'activité de l'amylase totale, de l'isoamylase pancréatique, de la trypsine et de la lipase immunoréactives, et le niveau d'hyperphospho-lipasémie est en corrélation avec la gravité de l'exacerbation de la CP.

Des méthodes plus sensibles - immunofluorométriques et radio-immunologiques - pour étudier l'activité des enzymes ont été développées. Ils permettent de déterminer non seulement la fraction totale de phospholipase A2, mais également l'activité de la proenzyme et de l'enzyme active. Avec une exacerbation de la CP, le rapport entre eux change brusquement vers une augmentation de l'activité phospholipase.

La détermination de l'activité de la fusfolipase A2 du premier type dans le sang est considérée comme sensible par rapport à l'insuffisance pancréatique exocrine, car le degré de diminution de l'activité de l'enzyme dans le sang est en corrélation avec les paramètres du test sécrétine-pancréozymine.

Sérum élastase-1

Il existe trois types d'élastases: les élastases pancréatiques des premier et second types et l'élastase neutrophile. Bien que ces enzymes aient des propriétés chimiques similaires, elles diffèrent considérablement d'un point de vue immunologique, ce qui permet de les déterminer séparément. Actuellement, le test d'immunosorbant lié à une enzyme (EL1SA - dosage d'immunosorbant lié à une enzyme) est utilisé. De cette manière, il est possible de déterminer l'activité du premier type d'élastase dans n'importe quel fluide biologique, mais à l'heure actuelle, des kits de réactifs sont produits pour l'étude de l'activité enzymatique uniquement dans le sang, ce qui permet d'évaluer le phénomène d'évasion enzymatique dans OP.

L'activité de cette enzyme dans le sang augmente avec la pancréatite plus tôt que l'activité d'autres enzymes et est conservée plus longtemps. La détermination de l'activité de l'élastase du premier type est considérée comme le test sensible le plus "tardif" pour diagnostiquer les exacerbations de CP, car l'augmentation du taux sanguin persiste pendant 8 à 10 jours après l'attaque. Pendant cette période, l'activité de l'élastase de type I dans le sang est augmentée chez 100% des patients, le taux de lipase - chez 85%, la trypsine immunoréactive - chez 58%, l'isoamylase pancréatique - chez 43%, l'os-amylase totale - chez 23% des patients.

Les informations sur la spécificité de l'hyperélastasémie sont contradictoires. On pense que l'activité de l'enzyme ne correspond pas au degré de destruction du tissu pancréatique et n'a pas une grande valeur diagnostique en cas d'insuffisance fonctionnelle chez les patients atteints de CP à long terme..

Enzymes pancréatiques rarement détectées

Moins couramment, la détermination de l'activité d'autres enzymes dans le sang est utilisée: carboxypeptidases A et B, déshydrogénases, nucléases, glutathion transférase, hyaluronate endoglucoaminidase, glipinamide, inotransférase, cholestérol estérase, cathepsines B, D, et L, etc. Le contenu des informations diagnostiques de ces tests ne justifie pas toujours la complexité et le coût de leur exécution. La détermination de la teneur en protéines associées à la pancréatite dans le sang et l'urine est considérée comme prometteuse. Table 2-9 résument les données sur la sensibilité et la spécificité de la détermination de l'activité d'un certain nombre d'enzymes pancréatiques sur la base des résultats d'études menées par les centres les plus compétents et les auteurs sont présentés..

Tableau 2-9. Valeur diagnostique de la détermination de divers marqueurs dans le diagnostic de la pancréatite aiguë

AN25TLI, Immunoréactivité de type trypsine, TLI)

Période d'exécution

3 jours ouvrables (plus 1-2 jours pour les régions)

Matériel d'étude

Méthode de détermination

L'étude de l'immunoréactivité de type trypsine (TLI) du sérum sanguin est une méthode de diagnostic spécifique à l'espèce de l'insuffisance pancréatique exocrine (EPI), réalisée à l'aide d'un dosage immunoenzymatique.

L'étude utilise des anticorps spécifiques à l'espèce que l'on trouve dans le sérum sanguin, ainsi que la trypsine cationique et le trypsinogène (zymogène ou enzyme trypsine inactive) associés à un inhibiteur de protéinase..

Le trypsinogène est synthétisé et stocké dans les cellules acineuses du pancréas et, dans des conditions physiologiques, est libéré dans le lit vasculaire en petites quantités. Le trypsinogène est converti en trypsine dans l'intestin grêle et est la forme active d'une enzyme protéolytique. Le trypsinogène et la trypsine ne sont pas absorbés par l'intestin. Ainsi, la TLI sérique reflète la libération réelle de trypsinogène directement à partir du pancréas. La trypsine et le trypsinogène sont très similaires et le test TLI peut détecter les deux enzymes dans le sérum. Le test révèle également une partie de la trypsine qui est liée de manière réversible à l'inhibiteur α. Tout cela explique le nom de cette étude..

Le syndrome du PEV se développe à la suite d'une diminution du nombre de cellules acineuses du pancréas, qui survient souvent avec une atrophie acineuse du pancréas (une prédisposition héréditaire chez les bergers allemands) ou une pancréatite chronique. La réduction des cellules acineuses entraîne une diminution de la synthèse et de la libération de trypsinogène dans l'intestin et dans le sang et une diminution de la TLI sérique. Les signes cliniques du PEV ne se développent généralement pas tant que la capacité fonctionnelle du pancréas n'a pas diminué à 10-15% de la normale.

L'étude TLI est utile pour différencier la maldigestion de la malabsorption primaire et devrait faire partie d'une étude de routine pour la diarrhée de l'intestin grêle canin. L'EIE doit être écartée avant d'envisager le diagnostic de maladie intestinale primitive. Dans la plupart des cas, le TLI est nettement réduit en PEV par rapport aux chiens en bonne santé ou aux chiens souffrant de malabsorption intestinale..
L'étude TLI, initialement proposée pour le diagnostic du PEV chez le chien, peut être utilisée comme test d'appoint pour une pancréatite suspectée (en l'absence de maladie rénale). Des valeurs TLI élevées sont généralement trouvées dans la pancréatite. Cependant, cette étude n'est pas aussi informative dans le diagnostic de la pancréatite que la détermination de la lipase pancréatique chez le chien. La spécificité a été trouvée à 65%, mais la sensibilité n'était que de 33%. La sensibilité de la méthode est réduite, probablement en raison de la courte demi-vie des enzymes étudiées. La valeur TLI peut revenir à la normale quelques heures après le début de la pancréatite. La valeur TLI la plus élevée est déterminée lorsque des signes cliniques de pancréatite apparaissent. Dans la pancréatite chronique, la concentration enzymatique sérique peut être insuffisante pour la détection. Certains chiens atteints de pancréatite peuvent avoir un TLI élevé avec des niveaux de lipase pancréatique normaux, et un TLI normal n'exclut pas la pancréatite, ce qui suggère que les deux sont nécessaires..

PRÉANALYSE

Pour obtenir des résultats plus précis, les animaux doivent suivre un régime de famine pendant au moins 12 heures avant l'étude..
L'échantillon est stable pendant 1 semaine à une température de stockage de + 2 ° C... + 8 ° C; reste stable pendant 2 mois lors de la congélation -17C... -23C.

INTERPRÉTATION

Les résultats de la recherche contiennent des informations exclusivement destinées aux médecins. Le diagnostic est fait sur la base d'une évaluation complète des différents indicateurs, des informations complémentaires et dépend des méthodes de diagnostic.

Unités de laboratoire VET UNION: ng / ml.

La trypsine dans le sang est normale

Troubles héréditaires Cet article traite des études de dépistage néonatal menées dans les pays européens avec le consentement des parents. Parmi tous les tests de laboratoire, ces tests sont les plus courants. Pour plus de commodité, ils ont reçu un nom commun - «dépistage des prélèvements sanguins de nouveau-nés», anciennement appelé «test de Guthrie».

Le dépistage des échantillons de sang goutte à goutte chez les nouveau-nés nécessite un prélèvement sanguin capillaire unique du talon sur 5-8 jours de vie. Le sang est prélevé par un visiteur de santé ou une sage-femme. Les gouttes de sang prélevées sont appliquées sur un papier filtre spécial, qui est inclus dans la carte «goutte à goutte» du nouveau-né, puis envoyées à un laboratoire spécialisé.

L'objectif principal de ce dépistage est d'identifier les nouveau-nés à haut risque ou souffrant de l'une des cinq pathologies héréditaires rares et graves: phénylcétonurie, hypothyroïdie congénitale, fibrose kystique, déficit en acyl-CoA déshydrogénase à chaîne moyenne, drépanocytose. Un diagnostic précoce et un traitement rapide permettent d'atténuer considérablement l'évolution de ces maladies et parfois de sauver la vie d'un enfant.

Ci-dessous seront brièvement considérés ces pathologies et analyses avec lesquelles elles peuvent être identifiées. Pour une meilleure compréhension du matériel, vous devriez considérer les questions générales de dépistage, qui sont décrites dans l'article "Programmes de dépistage et de dépistage".

Programme de dépistage pour la détection des maladies héréditaires chez les nouveau-nés par la méthode de la "goutte de sang"

L'efficacité de ce programme de dépistage, comme d'autres programmes nationaux, dépend du respect des normes de qualité et du moment choisi pour chaque étape. Les normes exigent des laboratoires qu'ils effectuent des tests de dépistage, y compris des tests supplémentaires (si nécessaire), dans les 4 jours suivant le prélèvement sanguin. L'obtention d'un résultat positif au test oblige le personnel du laboratoire à informer le groupe de coordination de l'établissement médical le même jour. Le groupe de coordination, à son tour, devrait organiser une visite immédiate (idéalement le lendemain) à l'hôpital par la famille de l'enfant malade afin de mener des procédures de diagnostic supplémentaires et des consultations appropriées. Le diagnostic doit être confirmé selon le protocole dans un délai de quelques jours. Le respect des normes approuvées implique de commencer le traitement d'un enfant malade à l'âge de 2 à 4 semaines. Si le traitement est retardé, l'enfant peut développer des changements irréversibles menant à un handicap.

Prélèvement d'un échantillon de sang

La première étape d'un programme de dépistage consiste à prélever un échantillon sanguin du nouveau-né, ce qui est fait par un visiteur de santé ou une sage-femme après avoir reçu le consentement éclairé des parents. Voici les actions standard décrites dans des protocoles spéciaux:

• Le prélèvement sanguin est effectué le 5ème jour de vie. Dans certains cas (à titre exceptionnel), la clôture est réalisée entre 5 et 8 jours de vie (l'anniversaire est considéré comme le jour zéro)
• Toutes les informations détaillées sur l'enfant sont entrées dans une carte spéciale. Il est important de saisir avec précision le numéro d'identification de l'enfant (tel que requis par le NHS - UK National Health Service). En l'absence de numéro d'identification ou d'autres informations importantes dans la documentation d'accompagnement, le laboratoire peut refuser d'accepter un échantillon de sang.

Figure 1. Carte «goutte à goutte» du nouveau-né

• Le talon de l'enfant, à partir duquel le sang est prélevé, doit être propre et sec (les excréments de l'enfant, qui peuvent atteindre le talon, contiennent une grande quantité de trypsine, un composant qui est déterminé dans le sang lors du dépistage de la fibrose kystique; si le sang est contaminé par des matières fécales, cela peut être la raison faux positif)
• Il est recommandé d'utiliser un pénétrateur automatique pour la ponction cutanée, qui pénètre à une profondeur ne dépassant pas 2 mm. La ponction doit être faite dans la surface plantaire (inférieure) du talon, pas dans le dos (vous pouvez toucher l'os du talon)
• Le sang doit circuler librement, sans aucune pression. Les échantillons de sang obtenus doivent être correctement appliqués, une goutte dans chaque zone de la carte, indiquée par le cercle correspondant. Dans ce cas, la carte «goutte» ne doit pas être pressée contre la peau - le sang doit couler librement sur le papier, saturant complètement chaque cercle. Une quantité insuffisante de sang (quelques petites gouttes dans chaque cercle) peut amener le laboratoire à refuser d'accepter cet échantillon. Une quantité excessive de sang appliquée (si les gouttes de sang se chevauchent) peut entraîner de faux résultats
• Avant de placer la carte «goutte à goutte» avec les échantillons obtenus dans le sac en plastique, assurez-vous que le sang est complètement sec. Ensuite, la carte avec les échantillons de sang est envoyée au laboratoire le même jour. Selon les normes en vigueur, les échantillons de sang doivent être reçus par le laboratoire au plus tard 3 jours à compter de la date de prélèvement.
• Si l'enfant a subi une transfusion sanguine (transfusion sanguine) avant que l'échantillon ne soit prélevé pour le dépistage, les résultats du test de drépanocytose (anémie) peuvent être faux (cela s'applique aux bébés prématurés et aux nouveau-nés admis en unité de soins intensifs pour diverses pathologies). Dans ce cas, un prélèvement sanguin pour le dépistage est effectué immédiatement après l'admission à l'unité de soins intensifs, ce qui implique que l'enfant peut avoir besoin d'une transfusion sanguine avant d'atteindre l'âge de 5 jours. Ces échantillons de sang sont envoyés au laboratoire marqué «pré-transfusion» et envoyés au laboratoire avec les échantillons prélevés à l'heure spécifiée (si l'enfant a reçu une transfusion sanguine). Si aucune transfusion n'a été réalisée, les prélèvements sanguins «pré-transfusionnels» ne sont pas envoyés au laboratoire. De plus, la carte doit indiquer tous les cas de transfusion sanguine..

PATHOLOGIES DÉTECTÉES À L'AIDE DE LA MÉTHODE «GOUTTE DE SANG»

Phénylcétonurie

La phénylcétonurie (PKU) est une maladie héréditaire caractérisée par une violation du métabolisme des acides aminés, principalement la phénylalanine (FA; un acide aminé essentiel). La pathologie survient chez environ 1: 10 000 nouveau-nés.

Les acides aminés (23 acides aminés sont importants pour le corps humain) sont les éléments constitutifs de tous les composés protéiques. La phénioalanine, comme certains autres acides aminés, ne peut pas être synthétisée dans le corps humain et doit être fournie avec de la nourriture. Ces acides aminés sont appelés essentiels. Autrement dit, la phénylalanine pénètre dans le corps humain uniquement avec des aliments protéinés. À son tour, le corps humain est capable de synthétiser (créer) certains acides aminés - des acides aminés non essentiels. La tyrosine, qui appartient au groupe des acides aminés non essentiels, est formée à partir de la phénylalanine (ces acides aminés sont similaires dans leur structure chimique). La réaction biochimique, dans laquelle se produit le processus de conversion de la phénylalanine en tyrosine, a lieu dans les hépatocytes (cellules hépatiques) et est contrôlée par l'activité de l'enzyme phénylalanine hydroxylase (HAP).

La phénylcétonurie résulte d'une mutation (défaut génétique) d'un gène responsable de la synthèse de la phénylalanine hydroxylase. En conséquence, il y a une diminution de l'activité ou l'absence de phénylalanine hydroxylase (en fonction de la mutation). Dans ce cas, l'intensité est perturbée ou la réaction de conversion de la phénylalanine en tyrosine est totalement absente..

La phénylcétonurie est héritée de manière autosomique récessive - l'enfant doit hériter de deux copies du gène mutant PAH (un gène de la mère, l'autre du père). Si l'enfant n'hérite que d'une seule copie du gène mutant, la maladie ne survient pas - il n'est qu'un porteur. Si le gène mutant est présent à la fois chez le père et la mère, il y a 25% de chances d'avoir un enfant avec PKU (1 chance sur 4).

Dans la phénylcétonurie, la phénylalanine s'accumule dans le sang et les tissus. Une partie de la phénylalanine est convertie en phénylcétones, qui sont excrétées dans l'urine, d'où, en fait, cette pathologie tire son nom (la présence de phénylcétones dans l'urine est appelée phénylcétonurie, qui est également le principal signe diagnostique de la maladie). Mais le plus grand danger de phénylcétonurie est associé à l'accumulation de phénylalanine dans le cerveau. Sans traitement opportun, qui doit être prescrit le plus tôt possible, la phénylcétonurie entraînera des dysfonctionnements persistants du cerveau et du système nerveux central (convulsions, troubles du développement mental, diminution de l'intelligence, autisme, etc.). Ces enfants et adolescents peuvent développer de graves troubles du comportement et des problèmes psychiatriques..

Étant donné que la prise de phénylalanine se produit uniquement avec de la nourriture, le traitement principal de la phénylcétonurie consiste à exclure cet acide aminé du régime alimentaire d'un enfant malade. Un régime à un âge précoce permet d'éviter les lésions cérébrales et de prévenir le développement de troubles neurophysiologiques causés par la phénylcétonurie. Le régime alimentaire doit contenir des aliments pauvres en protéines qui ne contiennent pas (ou presque pas) de phénylalanine. Ces mêmes restrictions doivent être respectées à l'adolescence, et idéalement tout au long de la vie. L'efficacité du respect du régime alimentaire et le suivi de l'évolution de la maladie sont effectués en passant régulièrement un test sanguin pour la teneur en phénylalanine dans le sang.

Test de dépistage de la phénylcétonurie

Le taux de phénylalanine (et, si nécessaire, de tyrosine) dans le sang est déterminé à l'aide de la méthode de spectrométrie de masse en tandem, qui permet de mesurer la concentration d'acides aminés dans un échantillon de sang goutte à goutte en quelques minutes (le nombre d'échantillons peut aller jusqu'à 600 par jour). Le procédé peut également être utilisé pour la détermination simultanée de tous les acides aminés et de divers métabolites intermédiaires dans un échantillon de sang. Par conséquent, la spectrométrie de masse en tandem est considérée comme une méthode potentielle pour le dépistage d'autres troubles métaboliques congénitaux (tels qu'une carence en acyl-CoA déshydrogénase à chaîne moyenne).

La concentration de phénylalanine dans le sang d'un nouveau-né en bonne santé est de 50 à 110 μmol / L. La phénylcétonurie «classique» sévère est caractérisée par une augmentation du taux de phénylalanine à 1000 μmol / L et plus (les formes moins sévères de PKU sont accompagnées d'une concentration plus faible de PA).

Le résultat du test de dépistage est considéré comme négatif si le test initial a montré un taux de phénylalanine inférieur à 200 μmol / L. Ce niveau de phénylalanine se trouve dans la plupart des échantillons sanguins et est donc exclu des tests supplémentaires. Si le taux de phénylalanine dépasse 200 μmol / L, l'échantillon sanguin est retesté (lors d'un nouveau test, le taux de phénylalanine et de tyrosine est déterminé). Les niveaux de phénylalanine jusqu'à 240 μmol / L (indépendamment des niveaux de tyrosine) sont considérés comme négatifs lors du retest. Si le taux de phénylalanine est supérieur à 240 μmol / L et le taux de tyrosine est inférieur à 240 μmol / L (c'est-à-dire que le taux de tyrosine n'est pas augmenté), le résultat est considéré comme positif. De tels indicateurs suggèrent la présence de PKU. Si les taux de phénylalanine et de tyrosine sont élevés, le test est considéré comme négatif.

Fibrose kystique

La fibrose kystique (mucoviscidose) est l'une des pathologies héréditaires les plus graves qui survient en raison d'une mutation dans un gène responsable du codage de la synthèse des protéines, appelé régulateur de la conductance transmembranaire de la fibrose kystique (MTPR). La pathologie est caractérisée par des lésions des glandes de sécrétion externe et de graves dysfonctionnements du système respiratoire. La maladie touche environ 1 nouveau-né sur 2500.

La fibrose kystique est héréditaire de manière autosomique récessive. Autrement dit, pour la survenue d'une pathologie, l'enfant doit hériter de deux copies du gène mutant - un gène chacun du père et de la mère. Si un seul gène est hérité, l'enfant sera un porteur sain de la maladie. Si le gène mutant est présent à la fois chez le père et la mère, la chance d'avoir un enfant atteint de fibrose kystique est de 25% (1 chance sur 4). Chez les races non caucasiennes, cette maladie héréditaire est beaucoup moins fréquente..

La mutation du régulateur de conductance transmembranaire de la fibrose kystique conduit à un dysfonctionnement de la protéine MTPL ou à son absence totale. Cette protéine est située sur la membrane des cellules épithéliales sécrétoires qui composent les glandes du corps humain. La tâche de cette protéine est de réguler le transport du liquide et des ions (chlorures, ions, etc.) à travers la membrane cellulaire. Avec cette fonction, l'activité sécrétoire normale des glandes est assurée. La viscosité et le volume de sécrétion des muqueuses du système respiratoire dépendent de la fonction de la protéine MTPP. Avec la fibrose kystique, la viscosité de la sécrétion muqueuse augmente considérablement, ce qui est à l'origine de troubles pathologiques dans les poumons du pancréas et des intestins.

Si un bébé naît avec la fibrose kystique, le seul symptôme précoce est une obstruction méconiale, trouvée seulement chez 10 à 20% des nouveau-nés atteints de fibrose kystique (le méconium est les matières fécales d'origine, qui est un substitut semi-liquide vert foncé qui est sécrété par les intestins des nouveau-nés dans les premières heures de la vie). Dans la fibrose kystique, le méconium est très dense et peut entraîner une obstruction de l'intestin grêle distal, provoquant le vomissement de l'enfant (dans ce cas, une intervention chirurgicale peut être nécessaire).

Les enfants atteints de fibrose kystique accusent un retard de développement physique au cours des premières années de vie. Le retard est causé par un apport insuffisant d'enzymes pancréatiques dans les intestins en raison de la viscosité excessive du suc pancréatique et du blocage des canaux pancréatiques. En raison d'un manque de jus pancréatique, les intestins ne sont pas capables d'absorber complètement les aliments, ce qui entraîne une carence en composants nutritionnels et, par conséquent, des troubles du développement.

La viscosité élevée des sécrétions bronchiques rend difficile l'élimination des bactéries des voies respiratoires, c'est pourquoi les enfants atteints de fibrose kystique souffrent de maladies respiratoires répétées avec des lésions pulmonaires progressives irréversibles. La dysfonction pulmonaire est une cause de décès prématuré chez les adultes atteints de fibrose kystique.

Avec fibrose kystique chez les nouveau-nés, sueur très concentrée (salée). Malgré le fait que ce signe n'a pas de signification clinique significative, il permet de confirmer la présence de cette pathologie, car une concentration élevée de sels peut être déterminée dans la sueur.

Malgré le fait que la fibrose kystique ne se prête toujours pas au traitement, la compréhension des processus physiopathologiques de cette maladie et une thérapie efficace peuvent améliorer considérablement la qualité et la durée de vie des patients. Cette maladie a été décrite pour la première fois en 1938. Ensuite, la plupart des enfants atteints de fibrose kystique sont décédés au cours de la première année de vie. L'espérance de vie moyenne des patients atteints de fibrose kystique dans les années 1990 était déjà de 31 ans. Aujourd'hui, ces patients peuvent vivre jusqu'à 50 ans. Le diagnostic précoce et le traitement de suivi commencé dans les premières semaines de vie jouent un rôle important à cet égard..

Test de dépistage de la fibrose kystique

Ce test consiste à mesurer le taux de trypsine dans le sang et, si nécessaire, à analyser l'ADN. La trypsine est une enzyme digestive synthétisée dans le pancréas à partir du proenzyme (enzyme inactive) trypsinogène. La fonction principale de la trypsine est le clivage des protéines et des peptides, ainsi que la participation à l'hydrolyse des esters. Chez les nouveau-nés atteints de fibrose kystique, les taux sanguins de trypsine sont élevés en raison de lésions du pancréas. Au fur et à mesure que la pathologie progresse, chez les enfants plus âgés, la concentration de trypsine dans le sang diminue en dessous de la normale. L'analyse incluse dans le programme de dépistage pour l'étude des nouveau-nés est appelée «trypsine immunoréactive» (IRT), car la trypsine dans le sang est déterminée par une réaction immunologique utilisant des anticorps qui réagissent uniquement avec cette enzyme.

Chez les nouveau-nés en bonne santé, le RTI normal est de 20 ng / ml; chez les patients atteints de fibrose kystique, la valeur de la trypsine immunoréactive dépasse souvent 100 ng / ml. Mais la raison de la valeur élevée de l'IRT n'est pas toujours la fibrose kystique.Par conséquent, dans le cas d'obtention d'une valeur élevée de trypsine, l'étape suivante du dépistage est effectuée - l'analyse de l'ADN, qui vous permet de déterminer les troubles génétiques correspondants..

Premièrement, tous les échantillons de sang sont testés immunologiquement. Si la valeur IRI ne dépasse pas 60 ng / ml, le résultat est considéré comme négatif. Ces valeurs de la teneur en trypsine sont typiques pour la plupart des nouveau-nés, elles sont donc exclues d'un dépistage ultérieur. Les échantillons de sang dans lesquels la valeur IRT dépasse 60 ng / ml sont soumis à des tests immunologiques répétés. Si les deux valeurs ne dépassent pas 70 ng / ml, le résultat est considéré comme négatif. Si la concentration de trypsine est supérieure à 70 ng / ml, des échantillons de sang sont soumis à des tests ADN.

L'analyse ADN pour le dépistage de la mucoviscidose consiste à examiner les 30 mutations les plus courantes dans le gène du régulateur de la conductance transmembranaire de la fibrose kystique, qui représentent ensemble 90 à 95% de tous les cas de fibrose kystique. Plus de 1600 mutations de ce type de ce gène sont connues, mais il n'est pas conseillé de les déterminer toutes. Le résultat du test est considéré comme positif si deux mutations sont déterminées (une de chaque parent). Si une seule mutation est identifiée, cela est considéré comme un porteur sain. A noter que dans certains cas, la détection d'une mutation peut signifier que le nouveau-né est atteint de fibrose kystique, si la seconde mutation appartient à la plus rare (pour laquelle aucune analyse n'a été réalisée).

Pour obtenir le résultat final du dépistage, une autre étude de la teneur en trypsine dans le sang par IRT est réalisée. Une valeur IRT inférieure à 120 ng / ml signifie «porteur probable»; IRT supérieur à 120 ng / ml - «présence probable de fibrose kystique». Si l'étude ADN n'a montré aucune mutation, cela signifie soit la présence de deux mutations rares (c'est-à-dire la présence de fibrose kystique), soit l'absence totale de mutations (pas de maladie). Dans ce cas, l'IRT est également effectué, comme décrit ci-dessus..

Hypothyroïdie congénitale

L'hypothyroïdie congénitale (CH) est une pathologie de la glande thyroïde qui survient immédiatement à la naissance, caractérisée par une carence partielle ou une absence totale d'hormones thyroïdiennes. La maladie touche environ 1 nouveau-né sur 3500.

L'hypothyroïdie congénitale survient pour deux raisons: une violation du développement de la glande thyroïde (80-85% des cas) et un défaut génétique (10-15%), dans lequel la production d'hormones thyroïdiennes diminue. Les malformations les plus courantes de la glande thyroïde chez les nouveau-nés comprennent l'hypoplasie (réduction de la taille) de la glande thyroïde, l'ectopie (localisation d'une glande thyroïde réduite à des endroits inhabituels) et l'agénésie (absence totale) de la glande thyroïde. Les anomalies énumérées ne sont pas causées par des troubles génétiques - elles surviennent sporadiquement au stade du développement embryonnaire. Les raisons du développement de telles anomalies n'ont pas été établies..

Une perturbation de la synthèse des hormones thyroïdiennes peut survenir en raison de défauts génétiques. En règle générale, les mutations affectent le gène responsable du codage de l'enzyme thyroïde peroxydase (TPO). La peroxydase thyroïdienne est impliquée dans la première étape de la synthèse des hormones thyroïdiennes (la connexion de l'iode à la tyrosine) (voir l'article «Physiologie de la glande thyroïde et des hormones thyroïdiennes»). Dans le cas d'un défaut génétique, l'activité de la TPO diminue, ce qui entraîne une diminution de la synthèse des hormones thyroïdiennes.

Dans de rares cas, l'hypothyroïdie congénitale survient non pas en raison d'une anomalie du développement de la glande thyroïde ou de troubles de la synthèse des hormones thyroïdiennes dans une glande saine, mais en raison d'un défaut de l'hypophyse, à la suite de laquelle il y a une violation (diminution) de la synthèse de la thyréostimuline (TSH). L'hormone stimulant la thyroïde régule la synthèse des hormones thyroïdiennes. Notez que le test de dépistage décrit dans cet article n'est pas destiné à détecter ces pathologies rares..

Les anomalies à l'origine de l'hypothyroïdie congénitale sont permanentes et nécessitent un traitement à vie. Il existe des cas où l'hypothyroïdie congénitale est transitoire (temporaire) et que l'enfant se rétablit au cours des premières années de sa vie. L'hypothyroïdie congénitale transitoire est fréquente chez les bébés prématurés. Le dépistage peut détecter une hypothyroïdie congénitale transitoire et permanente.

Les hormones thyroïdiennes jouent un rôle très important dans le développement d'un enfant (et pas seulement après la naissance, mais aussi pendant le développement fœtal). Au cours du développement intra-utérin, la carence en hormones thyroïdiennes chez le fœtus est compensée par les hormones thyroïdiennes de la mère, qui pénètrent par la barrière placentaire. Après la naissance, le développement (physique et mental) d'un enfant dépend de la capacité de sa glande thyroïde à synthétiser une quantité suffisante de ces hormones. Si un bébé naît avec une hypothyroïdie, quelle qu'en soit la cause, cela peut être la cause d'un handicap physique et mental. Et plus l'hypothyroïdie est détectée tardivement, plus les conséquences sont graves..

En règle générale, dans les premiers stades, l'hypothyroïdie congénitale se produit sans aucun symptôme. Une forme sévère d'hypothyroïdie congénitale chez le nouveau-né peut se manifester par des signes et symptômes non spécifiques: difficulté à sucer, léthargie, augmentation de la durée de la jaunisse physiologique, convulsions.

Avec la nomination opportune d'une thérapie de substitution (dans les 2-3 premières semaines de la vie d'un enfant), le plein développement physique et mental peut être assuré. Étant donné que l'hypothyroïdie congénitale ne présente aucun symptôme spécifique, un diagnostic précis ne peut être posé que par un test sanguin, ce qui est recommandé pendant la première semaine de vie. étant donné que le corps humain a constamment besoin d'hormones thyroïdiennes, il est nécessaire de prendre des préparations de lévothyroxine à vie pour rester en bonne santé.

Test de dépistage de l'hypothyroïdie congénitale

Un test de dépistage de l'hypothyroïdie congénitale consiste à mesurer les taux d'hormone thyréostimuline (TSH) dans des échantillons sanguins. L'hormone stimulant la thyroïde est une hormone hypophysaire impliquée dans la régulation de la sécrétion des hormones thyroïdiennes (voir l'article «Physiologie de la glande thyroïde et des hormones thyroïdiennes»), par conséquent, dans l'hypothyroïdie primaire, la concentration de TSH dans le sang est toujours augmentée.

Pendant l'accouchement, la concentration de TSH dans le sang du nouveau-né augmente fortement et, dans les premiers jours de la vie, elle revient progressivement à la normale. Au 5-8ème jour de vie, le niveau de TSH diminue à 5 mU / l et moins. Avec l'hypothyroïdie congénitale, la concentration de TSH à ce moment dépasse 20 mU / l (dans les formes plus douces d'hypothyroïdie - 10-20 mU / l). Si la concentration de TSH dans le sang est inférieure à 8 mU / L, le résultat du test de dépistage est considéré comme négatif (cette valeur est déterminée chez la plupart des nouveau-nés), ce qui permet de l'exclure d'un dépistage ultérieur. À une concentration de TSH supérieure à 8 mU / L, les échantillons sanguins sont soumis à deux analyses répétées. Si les trois analyses montrent une valeur TSH inférieure à 10 mU / L, le résultat est considéré comme négatif. Si les trois tests ont un niveau de TSH supérieur à 20 mU / L, le résultat du dépistage est considéré comme positif. La conclusion «état limite» est donnée lorsque les analyses montrent des niveaux contradictoires de TSH - 10-20 mU / l. Si un état limite est détecté, le sang est prélevé sur le nouveau-né dans les 7 jours pour une nouvelle analyse. Avec un niveau de TSH jusqu'à 10 mU / L lors de la réanalyse, le résultat du dépistage est considéré comme négatif, avec un niveau de TSH supérieur à 10 mU / L - positif.

Si le bébé est né prématurément (moins de 32 semaines), un deuxième prélèvement sanguin est nécessaire pour le dépistage le 28e jour de vie (si l'enfant sort de l'hôpital plus tôt, le prélèvement sanguin est effectué le jour de sa sortie). Dans ce cas, le résultat du dépistage est considéré comme négatif si la valeur TSH est inférieure à 10 mU / L, si le niveau TSH est supérieur à 10 mU / L - positif.

Déficit en acétyl CoA déshydrogénase à chaîne moyenne

Pathologie Un déficit en acétyl-CoA déshydrogénase à chaîne moyenne (MCAD) survient chez environ 1 nouveau-né sur 10 000. La maladie est caractérisée par une violation de l'oxydation des acides gras, grâce à laquelle le corps est capable d'obtenir de l'énergie à partir des réserves (dépôt) de graisse pendant le stress ou la famine. L'acétyl-CoA déshydrogénase à chaîne moyenne est une enzyme impliquée dans l'oxydation des acides gras, ou plutôt dans le processus de β-oxydation. La carence de cette enzyme clé est causée par une mutation (défaut héréditaire) dans le gène qui code pour l'acétyl-CoA déshydrogénase. Le résultat est une accumulation anormale d'acides gras et de leurs métabolites. Une telle accumulation peut entraîner des troubles métaboliques aigus et la mort..

DCASD, comme l'hypothyroïdie congénitale et la fibrose kystique, est héréditaire de manière autosomique récessive; c'est-à-dire que l'enfant doit hériter du gène des deux parents (l'héritage d'un mutant et d'un gène normal entraîne un portage sain). Dans le cas où la mère et le père sont porteurs du gène mutant, il y a 1 chance sur 4 que l'enfant naisse avec DCASD.

Étant donné que l'enzyme acétyl-CoA déshydrogénase n'est activée que dans des conditions de stress et de jeûne, le DCASD n'a pas de manifestations cliniques chez tous les enfants. Mais dans des conditions de stress ou de malnutrition causées, par exemple, par une infection, le DCASD peut se manifester par une pathologie aiguë grave.

Une caractéristique distinctive du DCASD est un niveau anormalement bas de produits d'oxydation des acides gras (cétones) et du glucose (hypoglycémie). Cette anomalie métabolique - hypoglycémie hypocétonique - s'accompagne d'une accumulation d'ammoniaque et d'une acidose métabolique. Le patient peut présenter des convulsions, des lésions du système nerveux central (cerveau) et un coma. Ces troubles métaboliques provoquent une mort rapide dans environ 25% des cas, le reste des enfants malades développent des anomalies neurologiques persistantes.

Le traitement principal du DCASD est le régime. Les enfants atteints de cette maladie ne devraient pas mourir de faim pendant une longue période et, pendant les périodes de maladie, ils devraient consommer suffisamment de glucides. Dans certains cas, un enfant malade peut nécessiter une hospitalisation à des fins de nutrition parentérale (l'introduction de nutriments contournant le tractus gastro-intestinal par perfusion intraveineuse). Vous devez également exclure les aliments contenant des graisses à chaîne moyenne (triglycérides) de l'alimentation..

Jusqu'à l'introduction de ce test de dépistage, le DCASD était diagnostiqué uniquement avec le développement des troubles graves décrits ci-dessus. Un diagnostic précoce et le respect du régime alimentaire peuvent prévenir des crises potentiellement dangereuses.

Test de dépistage du DCASD

Un test sanguin implique la détermination du niveau de deux métabolites d'acides gras - octoylcarnitine et décanoylcarnitine - par spectrométrie de masse en tandem. L'octoylcarnitine est composée d'un acide gras octanoïque à 8 atomes et la décanoylcarnitine est composée d'un acide à 10 atomes. Par conséquent, ces métabolites sont appelés C8 et C10.

Le résultat du dépistage est considéré comme négatif si le taux de C8 dans le sang est inférieur à 0,4 μmol / L. Cet indice C8 est déterminé chez la plupart des nouveau-nés, ce qui leur permet d'être exclus d'un dépistage ultérieur. Lorsque l'indice C8 est ≥ 0,4 μmol / L, l'échantillon sanguin est ré-analysé deux fois, dans lequel la concentration de deux métabolites, C8 et C10, est déjà déterminée. Si trois tests ont montré une concentration de C8 1, le résultat est positif, si "Test sanguin: érythrocytes, hémoglobine, indice érythrocytaire"). L'hémoglobine est une molécule protéique composée de quatre chaînes d'acides aminés, qui, en fait, forment la partie protéique de la molécule - la globine. Chacune de ces chaînes d'acides aminés est associée à un petit groupe - l'hème. Au centre de chaque groupe hème se trouve un atome de fer sous forme de Fe 2+. Si dans les chaînes de globine la séquence d'acides aminés peut varier avec la formation de sous-unités a, ß, y et δ, alors la structure de l'hème reste constante. Ainsi, environ 97% de l'hémoglobine est l'hémoglobine A, qui contient 2 sous-unités α et β. Les 3% restants sont de l'hémoglobine A2 (contient 2 sous-unités α et 2 δ). Au cours du développement intra-utérin et dans les premiers mois de la vie, l'hémoglobine fœtale, constituée de 2 sous-unités α et 2 γ, se forme principalement dans le corps de l'enfant. À partir du moment de la naissance, le niveau d'hémoglobine fœtale diminue progressivement et la synthèse d'hémoglobine A augmente. Et à l'âge de 2 à 6 mois, le niveau d'hémoglobine fœtale dans le corps d'un enfant est inférieur à 0,5% de la quantité totale d'hémoglobine. Au moment du test de dépistage (aux jours 5 à 8 de la vie), la teneur en hémoglobine fœtale est d'environ 75% et le taux d'hémoglobine A est de 25%.

La synthèse des brins α, β, γ et δ est codée par différents gènes. Les mutations de ces gènes provoquent la BSC.

La drépanocytose est causée par une mutation du gène qui code la chaîne β de la globine. Comme d'autres protéines, la globine β est constituée d'acides aminés combinés dans une séquence spécifique. La valine est le sixième acide aminé de cette molécule. Une mutation génique dans la drépanocytose a pour résultat que l'acide aminé glutamine remplace l'acide aminé valine en sixième position. À la suite de ce remplacement, une hémoglobine S anormale est formée, constituée de 2 sous-unités α normales et de 2 sous-unités β anormales. Si un gène BSC anormal est hérité d'un seul parent, chez un nouveau-né, la moitié de l'hémoglobine sera l'hémoglobine A normale, l'autre moitié sera l'hémoglobine S anormale. Un tel état hétérozygote est considéré comme bénin et est défini comme le portage de BSC. Environ 1 négroïde africain sur 7 et 1 négroïde des Caraïbes sur 8 sont porteurs de la drépanocytose. Dans la population de la population d'Europe du Nord, la fréquence de portage du BSC est d'environ 1: 500.

Toutes les femmes enceintes au cours du premier trimestre de la grossesse subissent un test de dépistage du portage de la drépanocytose. En cas de résultat positif au test, le père de l'enfant doit réussir le test. Lorsqu'une copie anormale d'un gène est héritée des deux parents, la totalité de l'hémoglobine de l'enfant est représentée par une hémoglobine anormale S. Cette condition est définie comme une anémie falciforme et est diagnostiquée dans environ 80% des cas de drépanocytose. Il existe d'autres formes de BSC dues à l'héritage d'un gène mutant d'un parent, et de l'autre parent, par une anomalie génétique plus rare, qui provoque également un défaut de la β-globine (dans ce cas, l'enfant développe deux types d'hémoglobine anormale, mais l'hémoglobine A est absente).

Pendant la désoxygénation, l'hémoglobine S polymérise, ce qui entraîne une modification de la structure de la membrane érythrocytaire - elle devient rigide. Les érythrocytes acquièrent une forme de croissant caractéristique (c'est pourquoi cette pathologie tire son nom). Compte tenu de l'état de rigidité, les globules rouges déformés sont très sensibles à l'hémolyse (destruction). Si la durée de vie d'un érythrocyte normal est d'environ 120 jours, les érythrocytes contenant de l'hémoglobine S sont d'environ 15 jours. Ainsi, une anémie hémolytique se développe..

La drépanocytose ne se manifeste qu'après la fin de la formation d'hémoglobine fœtale (qui ne contient pas de β-globine) - à l'âge de 3 à 6 mois. Les signes et symptômes de la SCB sont variables - ils peuvent apparaître modérément, cependant, chez la plupart des patients, les périodes de relativement bien-être (accompagnées uniquement d'anémie chronique) sont remplacées par des crises drépanocytaires très douloureuses.

Les crises de drépanocytose sont provoquées par le stress, l'effort physique excessif, l'hypothermie, la déshydratation, les maladies infectieuses, etc. Lors d'une crise, il se produit une hémolyse accrue et une séquestration des érythrocytes dans les capillaires des organes internes (os, rate, cerveau, poumons). C'est la séquestration qui est la principale cause de complications graves de la CSB. La microvascularisation est bloquée par la drépanocytose, empêchant ainsi le flux sanguin normal vers les tissus. Les drépanocytes désoxygénés (désoxygénés) sont irréversiblement endommagés. Si une hémolyse se produit dans la microvascularisation du cerveau, le patient peut développer une ischémie cérébrale et un accident vasculaire cérébral. Le blocage des vaisseaux sanguins dans les yeux entraîne une déficience visuelle. L'infarctus osseux pendant la croissance chez les jeunes enfants peut rendre un orteil ou une main plus court que les autres.

En SCB, la rate est affectée, ce qui est en partie responsable du risque élevé de maladies infectieuses. À une époque où la vaccination et la prophylaxie à la pénicilline n'étaient pas effectuées, la septicémie à pneumocoque généralisée était une cause fréquente de décès chez les patients atteints de SKB à un âge précoce..

C'est le diagnostic précoce, la surveillance et le traitement préventif de la drépanocytose qui peuvent réduire le nombre de complications et la mortalité..

Test de dépistage de la drépanocytose

Le test de dépistage SCB peut être effectué par deux méthodes qui peuvent être utilisées pour identifier les types d'hémoglobine dans un échantillon de sang - la chromatographie liquide et la focalisation isoélectrique. Ces méthodes nous permettent de déterminer des différences mineures dans la structure de l'hémoglobine A, A2, S et de l'hémoglobine fœtale. Le dépistage permet de détecter le portage de la BSC et de la drépanocytose (avec la BSC, les érythrocytes contiennent principalement de l'hémoglobine fœtale et des quantités égales d'hémoglobines A et S; avec la drépanocytose, uniquement l'hémoglobine fœtale et l'hémoglobine S).

• Présence d'hémoglobine A - absence de SCB
• La présence d'hémoglobine A, S et d'hémoglobine fœtale - le portage du gène mutant
• Hémoglobine fœtale et hémoglobine S - anémie falciforme

Ce dépistage détecte également d'autres hémoglobines anormales (C, E, D punjab, O arab) retrouvées dans la SCB (les conditions associées à ces hémoglobines sont différentes de la drépanocytose). Le protocole de dépistage exige que l'anomalie détectée soit confirmée par une autre méthode (c.-à-d. Si le résultat a été obtenu par focalisation isoélectrique, une nouvelle analyse doit être effectuée par chromatographie liquide).